1.5.7大黄对血管通透性的影响采用125I标记人血清白蛋白作放射活性测定，标记物125I-白蛋白经电泳结合率试验，结合力在98%以上。实验动物选用体重20-22g的健康小鼠，按体重配对分为大黄灌药组和生理盐水对照组。动物灌胃后2小时，从ip125I-白蛋白0.1ml(5uci)，30分钟后处死，洗出腹腔液，用FH-408定标器NaI井型闪烁晶体测得放射活性，最后换算成注入量的百分比。血管通透性降低时，测量得的放射活性高，反之则低。结果表明，大黄灌药组的血管通透性低于对照组，即药物对血管通透性有明显的抑制效应，经t值测验p<0.001。用伊文氏蓝染料法测定相似的结果，两法都证明大黄具有降低血管通透性效应。 1.6大黄素抗炎作用机理1.6.1大黄素对白三烯B4和PGE2生物合成的影响花生四烯酸的5-脂氧酶产物白三烯B4(LeukoTCMLIBieneB4，LTB4)是炎症反应的重要介质。它主要由多形核白细胞、巨噬细胞、肥大细胞等产生。白三烯B4可激活中性白细胞的多种反应，其中包括加速炎症介质的产生，并可促进中性白细胞在微血管内皮粘着，进而渗出血管，协同其它趋化因子使炎症反应扩大。它在依赖中性白细胞的炎症反应中起着一种内在放大器的作用，因此寻找LTB4生物合成的有效药物受到重视，为此研究了大黄素对LTB4和PGE2生物合成的影响，以探讨其抗炎作用机理，材料：大黄素临用前以0.01NNaOH溶解，生理盐水或缓冲液(pH8.1)稀释至试验浓度。花生四烯酸(AA)、钙离子载体A23187、PGB2和LTB4标准品均为Sigma公司产品，PGE2放免药盒(国产)，高效液相色谱仪：Perkim-Elmer-3B系列，分析柱250×0.46mmNueleosil-C18等。结果：大黄素对人血PNM合成LTB4及PGE2的影响为在无外源性AA的反应体系中，大黄素明显抑制A23187刺激PNM合成LTB4，抑制作用强度随大黄素浓度增高而增强，其IC50值为6.4×10-6mol/L；对PGE2合成无抑制作用，反而随浓度增大而合成增高。在有外源性AA(终浓度5x10-5mol/L)的反应体系中，大黄素抑制LTB4的作用减弱，但仍呈明显的浓度效应关系，IC50值为2.5x1O5mol/L，大约是前者的5倍，相反，PGE2的产率也随大黄素浓度的增加而递增，其递增斜率比无AA反应体系者为陡。 1.6.2大黄素在体外全血反应体系中对LTB4及PGE2生成的影响大黄素浓度高达1x10-4mol/L时，对人全血中LTB4的抑制率仅为62.3±4.8(n=3)，PGE2的生成量为对照组的101.2±10.1(n=3)。 1.6.3半体内试验，大黄素经体内给药后，可明显抑制兔全血反应体系中LTB4生成，给药5min后抑制作用即达高峰，但很快下降，30分钟后作用基本消失，至90分钟发现明显反跳现象。大黄素对PGE2的生成无抑制作用，PGE2的生成在5-15分钟呈增加趋势，并于15分钟有显着差异，但30分钟后即与对照组无明显差别。 1.6.4体内试验，大黄素(10mg/kg)对正常家兔PGE2的生成无抑制作用，时效曲线的形状与半体内试验相似，血中PGE2的变化规律一致。以上实验结果表明，大黄素在体内外条件下可抑制LTB4生物合成，对PGE2的生成无抑制作用，提示大黄素是一个选择性的花生四烯酸5-脂氧酶抑制剂。这一结果为阐明大黄素的抗炎等机理提供了新线索。 1.7炮制对大黄消炎作用的影响1.7.1对大鼠蛋清性关节肿的影响按常规方法，大黄生品及炮制品煎剂的剂量均为8g/kg，对照组给同体积水，阳性对照用氢考20mg/kg，均为ig给药。大黄冷浸液、大黄煎液、熟军煎液等对在鼠蛋清性足跖肿胀亦有显着的抗对作用。 1.7.2对巴豆油诱发小鼠耳部炎症的影响实验组给大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当生药量)，对照组用生理盐水，阳性对照用氢化考的松(氢考)20mg/kg，均为ip给药。给药30分钟后，在小鼠耳部正、反两面各涂巴豆油0.05ml，4小时后处死小鼠，取两耳同一部位0.8mm组织，称重，以左、右两耳重量之差作为肿胀指标。 1.7.3对棉球肉芽肿增生的影响大鼠生品及炮制品醚提物对小鼠和大鼠棉球肉芽肿增生的影响：选用30g左右体重雄性小鼠和150-200g雄性大鼠，按常规操作方法。 1.7.4对小鼠胸腺及体重的影响用体重12-18g小鼠56只，等分成7组，大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当于生药量)，对照组给等容积的生理盐水，阳性对照给氢考10mg/kg，均由ip，每日1次，连续7日，8日摘出胸腺，在组织天秤上称重，比较各组间的差异。 实验结果表明，大黄经炮制后消炎作用受到不同程度的影响，主要是酒炖大黄和大黄炭的消炎作用有所减弱。大黄醚提物8g/kg(相当于生药量)，ip7日后小鼠胸腺明显萎缩，这一现象提示大黄对炎症末期的消炎作用是否与免疫抑制有关。 1.7炮制对大黄消炎作用的影响1.7.1对大鼠蛋清性关节肿的影响按常规方法，大黄生品及炮制品煎剂的剂量均为8g/kg，对照组给同体积水，阳性对照用氢考20mg/kg，均为ig给药。大黄冷浸液、大黄煎液、熟军煎液等对在鼠蛋清性足跖肿胀亦有显着的抗对作用。 1.7.2对巴豆油诱发小鼠耳部炎症的影响实验组给大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当生药量)，对照组用生理盐水，阳性对照用氢化考的松(氢考)20mg/kg，均为ip给药。给药30分钟后，在小鼠耳部正、反两面各涂巴豆油0.05ml，4小时后处死小鼠，取两耳同一部位0.8mm组织，称重，以左、右两耳重量之差作为肿胀指标。 1.7.3对棉球肉芽肿增生的影响大鼠生品及炮制品醚提物对小鼠和大鼠棉球肉芽肿增生的影响：选用30g左右体重雄性小鼠和150-200g雄性大鼠，按常规操作方法。 1.7.4对小鼠胸腺及体重的影响用体重12-18g小鼠56只，等分成7组，大黄生品及炮制品醚提物8g/kg(相当于生药量)，对照组给等容积的生理盐水，阳性对照给氢考10mg/kg，均由ip，每日1次，连续7日，8日摘出胸腺，在组织天秤上称重，比较各组间的差异。 实验结果表明，大黄经炮制后消炎作用受到不同程度的影响，主要是酒炖大黄和大黄炭的消炎作用有所减弱。大黄醚提物8g/kg(相当于生药量)，ip7日后小鼠胸腺明显萎缩，这一现象提示大黄对炎症末期的消炎作用是否与免疫抑制有关。 2.对心血管系统的影响2.1降压作用1938年SupniewskiTV等报道，大黄素对动物有降低血压的作用，其降压作用与剂量有相关性。大连铁道医学院曾报道，急性实验，大黄浸剂和去醇大黄酊剂iv给药，能使家兔血压明显降低。还有报道，大黄水煮酒沉制剂iv给药，可使麻醉犬的血压降低，心肌耗氧量增加，提高心肌氧利用率。波叶大黄多糖，十二指肠给药45mg/kg，可使正常大鼠血压降低20%，心率减慢12%。 2.2对心脏的作用波叶大黄多糖0.86mg/ml，可使正常蟾蜍离体心脏收缩力增加29%，使衰竭离体蟾蜍心脏收缩力增加70%，心输出量增加58%。应用电生理技术研究大黄对蟾蜍心肌收缩力的影响，发现大黄能使离体蟾蜍心脏的收缩力明显增强，心率减慢，(P<0.01)。随药物剂量的增加，心肌活动由兴奋逐渐转为抑制，并出现异位心律，增加细胞外液钾离子浓度，可恢复窦性心律，提示大黄对蛙心的强心作用有可能是通过抑制心肌的Na+-K+-ATP酶而实现的。大黄还可对麻醉犬的心肌耗氧量、氧利用率、心输出量、心搏指数增加，而使冠脉阻力、左室功能等下降。 2.3对离体血管的作用实验采用20只家兔的121条离体血管及22例病人在手术时离体的55条胃肠道血管，置于含有营养液的浴池中，通过换能装置记录血管条的活动及大黄对其影响。药物用大黄醇提液，每1ml含生药1g。结果表明，大黄醇提液具有兴奋这两类离体血管的作用，表现为：提高离体血管条的收缩力，能增强部分血管条的自发节律活动。实验还是显示酚妥拉明能拮抗大黄醇提液对离体血管条的收缩力。 2.4对微循环的影响实验用英国种LACA系健康小白鼠，体重26-34g，大黄及对照组各10只。大黄混悬液(由上海市卢湾区中心医院提供的临床制剂，配制成20%混悬液)以0.25ml/10ig。给药后1、2小时观察微循变化。结果：微动脉：大黄组10只动物；给药l小时后微动脉血流呈线流6只，而出现红细胞聚集呈线粒流者4只，对照组给水1小时后，10只动物全为线流。但统计处理X2测验0.05 2.5对血脂代谢的影响大黄对正常兔血清胆固醇无影响，但对因服胆固醇而血清胆固醇升高则有明显的抑制作用，血清胆固醇和总磷脂比值明显下降。大黄(R.officinale)粗提物ip给大鼠(体重100克左右)，8小时后测定血清胆固醇和尿素氮，结果每只大鼠给于5mg剂量时血清胆固醇十分明显升高。波叶大黄(R.Otaoense)中提取的多糖有明显的降血指作用。Ig波叶多糖(RHP)100和200mg/kg，可分别使蛋黄诱导的高脂血症小鼠血清总胆固醇(TC)降低45%和46%，甘油三脂(TG)降低42%和67%；肝脏TC分别降低63%和65%，TG降低14%和55%，过氧化脂质(MDA)降低49%和66%。igRHP100和200mg/kg对正常小鼠血清TC无明显影响。igRHP45和90mg/kg可分别使高脂饲料诱导的高脂血症大鼠血清TC降低48%和50%，TG降低30%和31%；肝脏TC降低57%和62%，TG降低23%和30%。MDA降低26%和41%。用不同溶剂对大黄进行提取物对大鼠的实验性高胆固醇血症进行降脂试验。结果表明，大黄的醇提部位有明显的降低血清总胆固醇作用。石油醚提取部位作用不显着。 3.对泌尿系统的影响3.1大黄蒽醌衍生物对家兔的利尿作用和肾髓质Na＋-K＋-ATP酶活性的抑制作用。 3.1.1蒽醌衍生物对家兔排尿、排Na＋和K＋量的影响 取体重2kg左右雄金基拉兔，自由饮水，禁食18小时后麻醉，麻醉后以剂量为30mg/kgig给药，药物用0.1mol/LTCMLIBis一HCI缓冲液(pH8.5)新鲜配制。对照组给以同体积缓冲液。(pH8.5)新鲜配制。对照组给以同体积缓冲液。同时用50ml/kg生理盐水ig做水负荷，迅速打开腹腔，抽空膀胱内余尿，从膀胱腹面下部插管，每间隔2小时收集尿液1次。结果：大黄素和大黄酸对家兔排尿、排Na＋和排K＋有明显促进作用。一般在给药后0-2小时排尿量即明显增加，2-4小时达高峰，分别为对照组的5.9和5.8倍(P<0.005)。8-10小时接近对照组水平，排Na＋和K＋量的增多与排尿量平行，给药后2-4小时高峰，Na＋分别为对照组的4.4和4.6倍(P<0.01)；K＋分别为对照组3.2和3.9倍(P<0.005)。而芦荟大黄素和大黄酚的作用较弱，在给药后2-4小时排尿量分别为对照组的2.3和2.4倍(P<0.01)，排K＋为对照组的1.6和2.3倍(P<0.01)，排Na＋量则无显着变化。作图法表明。大黄素和大黄酸的利尿作用与排Na＋作用呈良好线性关系，其相关系数分别为0.992和0.993，而排K＋作用的线性关系较差，分别为0.406和0.790。 |
