4.4 标本留取 4.4.1 应保存至少两段与脐带血冷冻袋相连的管路标本，每段至少 100μL。 4.4.2 应保存至少 2 管非肝素化脐带血血浆标本，至少 2 管非肝素化母亲外周血血浆标本。每管容量应至少 1.8 mL，储存在-18 ℃以下。 4.4.3 应保存适合制备至少 20μg 基因组 DNA 的脐带血和母亲外周血标本，可以为提纯的 DNA、冷冻细胞或印迹。
5 脐带血造血干细胞冻存 5.1 环境 5.1.1 应卫生整洁，具备防火、防水、防震、防液氮泄漏的安全措施。 5.1.2 应配备门禁系统，未经授权人员不应进入。 5.1.3 冻存区域的温度和湿度应符合设备厂家的规定，并进行记录。必要时配备强排风和除湿机等设备。 5.1.4 使用液氮的区域应连续监测空气中的氧含量。若氧含量低于 19.5%时，应有声/光报警，并采取通风措施；非紧急情况下，应待氧含量恢复正常后，工作人员才能进入。 5.1.5 在使用液氮的区域入口外应备有应急氧气面罩，以供工作人员在氧气含量低的紧急情况下进入使用。 5.2 冷冻 5.2.1 应在采集后 48 h 内开始脐带血造血干细胞的冷冻。 5.2.2 制备后的脐带血造血干细胞应在无菌条件下或采用密闭系统，缓慢添加冷冻保护剂，边加边振荡，使细胞和冷冻保护剂充分混匀。宜采用微量注射泵控制冷冻保护剂的添加速度。若冷冻保护剂含二甲基亚砜（DMSO），使用前应预冷至 2 ℃～8 ℃。DMSO 的终浓度为 5%～10%。 5.2.3 应将脐带血冷冻袋放入保护盒后进行冷冻。 5.2.4 程控降温仪的降温程序应经过确认。不使用程控降温仪时，冷冻方法应经验证和评估。 5.2.5 应记录冷冻保护剂输注开始时间和程控降温开始时间。从添加冷冻保护剂到开始程控降温的持续时间应尽量缩短并经过验证。 5.3 隔离 5.3.1 应对脐带血造血干细胞制备和冷冻过程中发现的疑似不合格品进行标识和隔离，以进一步调查和判断。 5.3.2 应将待检测脐带血造血干细胞和不合格脐带血造血干细胞进行隔离储存，防止库存脐带血造血干细胞的交叉污染和误放行。 5.3.3 母血标本输血相关传染病标志物检测结果呈反应性或检测结果未明确时，脐带血造血干细胞应一直隔离储存。 5.3.4 对于应隔离储存的脐带血造血干细胞，宜将其储存在有明确标识的物理隔离区域，或是通过其他程序进行识别，包括信息管理系统的状态指定。 5.4 入库放行 5.4.1 入库放行人员应为脐带血造血干细胞库主任或其指定人员，质量管理人员应监控脐带血造血干细胞的放行，并有监控记录。 5.4.2 入库放行人员应正确识别每份合格入库放行的脐带血造血干细胞。脐带血采集、制备、冷冻和检测环节应符合入库放行标准，并审核相关记录。 5.4.3 入库放行人员应正确识别每份不合格脐带血造血干细胞。审核脐带血采集、制备、冷冻和检测环节不符合入库标准的相关记录，应对不合格脐带血造血干细胞进行有效处置。 5.5 储存 5.5.1 库存管理 5.5.1.1 应准确记录脐带血造血干细胞和相关标本的储存位置，储存位置信息至少应包括储存设备编号、冻存架编号及位置编号。 5.5.1.2 应采用电子信息系统对脐带血造血干细胞库存进行动态管理。 5.5.2 储存温度与监测 5.5.2.1 冷冻处理后脐带血造血干细胞的储存温度应不高于-150 ℃。 5.5.2.2 储存设备应具备实时监控和报警装置。储存脐带血造血干细胞的液相液氮罐，应对液氮液位进行连续监测，至少每 24 h 记录 1 次。储存脐带血造血干细胞的气相液氮罐，应对罐内温度进行连续监测，至少每 4 h 记录 1 次。每周应至少测量液氮罐的液氮液位 1 次，若测量值和液氮罐显示值差异超过设备厂家允许误差，应进行校准。 5.5.2.3 储存设备发生报警时应及时处理，采取措施避免储存脐带血造血干细胞的升温；解除报警后，应对报警原因进行分析和记录。 5.5.2.4 若脐带血造血干细胞在转罐及提取时发生升温事件导致冷冻袋表面温度＞-150 ℃，则应记录该升温事件的持续时间，并评估对脐带血造血干细胞质量的潜在影响。 5.5.3 应配备液氮低温防护器具，至少应包括耐低温手套和防护面罩。 5.5.4 应制定液氮泄漏应急预案，每年对工作人员至少进行 1 次培训和演练。 5.5.5 应巡检液氮储槽。每天至少检查 1 次液氮储槽安全阀、压力表及各个阀门的状态，并记录液氮储槽压力与液位的数值。 |
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