附录A 培养基和试剂 A.1 磷酸盐缓冲液 A.1.1 成分 磷酸二氢钾 34.0g 蒸馏水 500 mL A.1.2 制法 贮存液:称取 34.0g的磷酸二氢钾溶于500 mL蒸馏水(或其他符合要求的实验用水,下同)中,用大约 175 mL 的1 mol/L氢氧化钠溶液调节pH至7.2±0.2,用蒸馏水稀释至1000 mL,密封贮存于冰箱。工作液:取贮存液 1.25 mL,用蒸馏水稀释至1000 mL,分装于适宜容器中,121℃高压灭菌15 min，用作样品稀释。 A.2 生理盐水 A.2.1 成分 氯化钠
8.5g 蒸馏水 1 000 mL A.2.2 制法 将氯化钠在蒸馏水中溶解,121℃高压灭菌15 min. A.3 月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤 A.3.1 成分 胰蛋白胨或胰酪胨20.0 g 氯化钠 5.0 g 乳糖 5.0g 磷酸氢二钾 2.75g 磷酸二氢钾 2.75 g 月桂基硫酸钠 0.1g 蒸馏水 1 000 mL A.3.2 制法 将各成分(双料 LST 肉汤除蒸馏水外,其他各成分的用量加倍)加入蒸馏水中加热溶解，必要时调节pH。分装至有小倒管的试管中,每管10mL。121℃高压灭菌 15 min,灭菌后培养基在25℃时的pH 为 6.8±0.2。 A.4 煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤 A.4.1 成分 蛋白胨 10.0g 乳糖 10.0 g 牛胆粉 20.0 g 煌绿 0.0133 g 蒸馏水 1 000 mL A.4.2 制法 将各成分在蒸馏水中加热溶解,必要时调节pH。分装至有小倒管的试管中,每管10mL,121℃高压灭菌 15 min,灭菌后培养基在25℃时的 pH为7.2±0.2。 A.5 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA) A.5.1成分 蛋白胨 7.0g 酵母浸粉 3.0g 乳糖 10.0g 氯化钠 5.0g 胆盐或3号胆盐 1.5g 中性红 0.03 g 结晶紫 0.002 g 琼脂 15.0 g~18.0g 蒸馏水 1 000 mL A.5.2 制法 将各成分加入蒸馏水中,边搅拌边加热至完全溶解，必要时调节pH。煮沸杀菌,煮沸时长不超过2 min。培养基宜在 24h内倾注平板。煮沸后培养基在25℃时的 pH 为7.4±0.2. A.6 1 mol/L NaOH A.6.1 成分 氢氧化钠 40.0g 蒸馏水 1 000 mL A.6.2 制法 称取40g氢氧化钠溶于1000 mL蒸馏水中。 A.7 1 mol/L HCI A.7.1 成分 浓盐酸 89 mL 蒸馏水 1 000 mL A.7.2 制法 量取浓盐酸 89 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL。 |
