附录A （规范性） 培养基 A.1 改良罗氏培养基 A.1.1 成分 L-天冬酰胺或谷氨酸钠 7.2 g 磷酸二氢钾 2.4 g 硫酸镁 0.24 g 柠檬酸镁 0.6 g 甘油 12 mL 蒸馏水 600 mL 鸡蛋匀液 1000 mL 2%孔雀绿 20 mL A.1.2 制法 各盐类成分加入600
mL蒸馏水溶解后，混匀，沸水浴或煮沸30 min，也可121 ℃灭菌15 min，待冷后，加入经消毒纱布过滤的新鲜鸡蛋匀液1000 mL，混匀，加2%孔雀绿20 mL，混匀，分装试管（18 mm×180 mm），每一试管加培养基约7 mL，培养基斜面高度为培养基占试管底部的三分之二处为宜；若制作培养基平板，则每皿（φ=9 cm）加约30 mL～35 mL，置蒸汽凝固器内凝固。 凝固器预热后，放入分装好的培养基试管或平板，以摆放两层为宜。待凝固器内温度达85 ℃～90 ℃，计时，凝固1 h～1.5 h后取出，放冷﹐无菌试验后放4
℃冰箱备用，一个月内使用。 注：制备的培养基颜色鲜艳，表面光滑湿润，无气泡，有一定韧性和酸碱缓冲能力。 A.2 标准硬水（硬度 342 mg/L） 氯化钙（CaCl2）
0.304 g 氯化镁（MgCl2•6H2O） 0.139 g 纯化水 1000 mL 将各成分加入到1000
mL纯化水中，待完全溶解后，用0.45 μm滤膜过滤除菌备用。 A.3 有机干扰物 A.3.1 牛血清白蛋白（BSA） 牛血清白蛋白 30 g或3 g 纯化水 1000 mL 将牛血清白蛋白加入到1000
mL纯化水中，待完全溶解后用微孔滤膜（孔径为0.45 μm）滤过除菌，4 ℃冰箱保存备用。 a) 对未清洗物品的消毒效果评价时：称取 30 g 牛血清白蛋白，溶于
1000 mL 纯化水中，待完全溶解后用微孔滤膜（孔径为 0.45 μm）滤过除菌，4 ℃冰箱保存。 b) 对清洗过物品的消毒效果评价时：称取 3 g 牛血清白蛋白，溶于
1000 mL 纯化水中，待完全溶解后用微孔滤膜（孔径为 0.45 μm）滤过除菌，4 ℃冰箱保存。 A.3.2 胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TSB） 胰蛋白胨 1.5%（g/100 mL） 大豆蛋白胨 0.5%（g/100 mL） 氯化钠 0.5%（g/100 mL） 用纯化水配制而成，调节pH为7.0～7.4，经121 ℃压力蒸汽灭菌20 min备用。 A.4 磷酸盐缓冲液（PBS，0.03 mol/L，pH7.2） 无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）
2.83 g 磷酸二氢钾（KH2PO4）
1.36 g 将各成分加入到1000
mL蒸馏水或纯化水中，待完全溶解后，于121 ℃压力蒸汽灭菌20
min备用。 A.5 胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS） 胰蛋白胨 1.0 g 氯化钠 8.5 g 纯化水 1000 mL 先用900 mL以上纯化水溶解，并调节pH值在7.0～7.2（20 ℃），最终用纯化水加至1000 mL，分装后，经121 ℃压力蒸汽灭菌20 min后备用。 A.6 苏通（Sauton）综合液体培养基 KH2PO4 0.5 g MgSO4·7H2O 0.5 g 柠檬酸铁铵 0.05 g 柠檬酸 2.0 g 甘油 60 mL L-天冬酰胺 4.0 g 纯化水 1000 mL 将各成分加入到1000
mL纯化水中，加热溶解后，用氨水调节pH至7.2，过滤、分装，121 ℃灭菌20 min，冰箱保存备用。 A.7 营养肉汤培养基 蛋白胨 10.0 g 氯化钠 5.0 g 牛肉膏 5.0 g 纯化水 1000 mL 将各成分溶解于1000
mL纯化水中，调节pH至7.2～7.4，分装，于121 ℃压力蒸汽灭菌20
min备用。 |
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